一次隔離
在操作控制危險微生物的場所,通常把危險微生物隔離于一定空間內,這種危險微生物和操作者之間的隔離即為一次隔離,它是以防止操作人員被感染為目的的。實驗室臺面實驗脊椎動物生物安全防護實驗室，其適用微生物范圍與同級的一般生物安全防護實驗室相同。一次隔離主要有三種方式方法,即生物學安全柜。
二次隔離
二次隔離是指實驗室和外界之間的隔離,它是以防止病原體從實驗室漏到外部環境中感染實驗室外的人為目的的。 由于生物學的危險事例幾乎都發生在實驗室中,所以一次隔離十分重要,一次隔離實行得越嚴格充分,則實行二次隔離的必要性就可以降低,相應地可以最大化減少隔離費用和降低隔離困難（difficult)程度。在實施二次隔離的情況(Condition)下,生物學安全柜和穿罩式防護衣的人都處于負壓實驗室??隔離區內。簡單一點的隔離做法是在隔離區外設常壓維持區,維持區最好把隔離區圍起來。
生物安全實驗（experiment)室平面布置 
    1.對有生物危險性的PⅢ實驗室，要做成負壓，以防止微生物感染的外逸。因此它不僅要求除菌、更要進行隔離處理。隔離方式方法一般采用一次隔離和二次隔離。一次隔離就是病原體和實驗者之間的隔離，是以防止實驗人員被感染為目的的。主要用生物安全柜和罩式防護衣方式。 
    2.為了防止病原體從實驗室漏到外部環境中，而把實驗室和外界阻隔，即是二次隔離。實驗室臺面每類生物安全防護實驗室根據所處理的微生物及其毒素的危害程度各分為四級。各級實驗室的生物安全防護要求依次為：一級最低，四級最高。二次隔離就是實驗室和外界之間的隔離，是以防止實驗室外的人被感染為目的的。 污染傳播的主要途徑是氣溶膠的擴散和對病原體的直接接觸。特別是前者，僅僅靠改善操作方式是不能解決的，一般采取在隔離區和維持區之間建立氣壓差和對排風進行滅菌處理兩種方法。 
    3.隔離區（PⅢ實驗室）應維持壓差（負壓）一般為-20～-50Pa，使維持區到隔離區造成定向氣流。 
    4.在氣壓不同區域之間設有氣閘（zhá)室，它的兩邊設有聯鎖的門，一邊開時，另一邊關閉，以維持壓差。微生物實驗室結構和設施、安全操作規程、安全設備適用于對健康成年人已知無致病作用的微生物，如用于教學的普通微生物實驗室等。 
    5.整個PⅢ實驗室區域的室內壓差等級從低到高依次是：P-Ⅱ生物安全柜